Cascading recombinase memory switch for programmable and stable gene expression in Pseudomonas putida.
本研究针对模式细菌基因线路在非模式宿主中表现不佳的问题,在恶臭假单胞菌中构建了基于整合酶的级联翻转开关,以实现一致且可编程的基因表达。该系统将驱动Bxb1丝氨酸整合酶的鼠李糖诱导触发模块与紧凑绝缘的倒位模块耦合,提供二元开关状态;通过控制正交T7 RNA聚合酶基因表达激活可替换的PT7驱动目标模块。翻译水平调控使关闭状态严密、诱导强烈,切换高效且去除诱导剂后表型稳定,可作为遗传记忆元件。该系统进一步调控超活性双鸟苷酸环化酶以触发生物膜形成,并在2-氟顺,顺-粘康酸生产菌株中实现连续模式下由开关介导的催化生物膜稳定生产。
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完整作者
Javier M Hernández-Sancho、Daniel C Volke、Pablo I Nikel
作者机构
- BRIGHT, Technical University of Denmark, 2800 Kongens Lyngby, Denmark.
技术路线
数据/样本:以Pseudomonas putida为宿主,构建基于Bxb1丝氨酸整合酶的级联双稳态开关,由鼠李糖诱导模块驱动,连接绝缘倒位模块产生二元OFF/ON转录状态;开关控制正交T7 RNA聚合酶基因以激活可替换的PT7靶模块;对整合酶与T7 RNA聚合酶基因进行翻译水平调谐。分析:评估开关效率、OFF态紧密性、诱导强度及去除诱导剂后的表型稳定性(遗传记忆)。验证:通过调控超活跃二鸟苷酸环化酶触发生物膜形成,并在2-氟顺,顺-黏康酸生产菌株中实现连续模式下开关介导的催化生物膜稳定产化。
最近 5 个完整年度引用趋势
不含 2026 年,仅展示最近 5 个完整年度。

为什么值得关注
AI 辅助短评,基于标题和摘要整理该研究针对遗传电路在非模式宿主恶臭假单胞菌中表现不佳的问题,构建整合酶级联开关,实现可编程、稳定的基因表达与遗传记忆。其价值在于将记忆元件与生物膜表型及连续生产耦合,拓展了假单胞菌合成生物学工具,但性能仍限于该宿主与特定产物场景。